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荧光显微镜,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别

admin admin 发表于2024-03-21 14:29:22 浏览19 评论0

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比较荧光显微镜和普通显微镜的区别

照明方式和光源不同。1、照明方式不同：荧光显微镜的照明方式是用落射式，也就是说光源是通过物镜来投放于试验样本上，而普通显微镜是用透射光来进行照明的。2、光源不同：荧光显微镜使用的是紫外光，而普通显微镜使用的是可见光作为照明光源。

荧光显微镜的主要结构包括

荧光显微镜的主要结构包括透射光系统、反射光系统、照相系统。
1、透射光系统
（1）光源部分
石英汞灯石英质外壳内充填超高压或高压汞气的灯管；消球差透镜；通过该透镜可使由光源来的光线形成清晰而平行的光束；激励滤光片。
（2）仪器主体部分
与生物显微镜构造基本相同，具有台下棱镜、台下聚光镜及载物台等，先进的还具有偏光装置。
（3）物镜及目镜镜头，进行肉眼观察和在紫外线透射光下照相用的，常配有石英萤石物镜、玻璃透镜、消色差物镜等。
（4）抑制滤光片，为了保护观察者的眼睛。
2、反射光系统
它的光源系统与透射光系统相同，不同的是它直接将荧光发生器安装在显微镜基座上。这样由光源来的光改变了原光路系统，使紫外光先经过物镜上端，通过物镜照射到载片的物体或岩石磨光面上，将激发的荧光反射回物镜经目镜到达观察者的眼睛。
3、照相系统
主要包括电子测光装置、变倍镜头、照相机和控制盘，照相机一般都装置在仪器主体的顶端，由电缆连接控制台，操作极为方便。
荧光显微镜的标本制作要求：
1、盖玻片
盖玻片厚度在0.17mm左右，光洁。为了加强激发光 ，也可用干涉盖玻片，这是一种特制的表面镀有若干层对不同波长的光起到不同干涉作用的物质（如氟化镁）的盖玻片，它可以使荧光顺利通过，而反射激发光，这种反射的激发光可激发标本。
2、标本
组织切片或其他标本不能太厚，若太厚激发光大部分消耗在标本下部，而物镜直接观察到的上部不充分激发。另外，细胞重叠或杂质掩盖，影响判断。

普通光学显微镜和荧光显微镜的原理有何异同点

普通光学显微镜和荧光显微镜虽然都是用来观察微小物体的工具，但它们的原理有所不同。普通光学显微镜的原理是利用光学的折射和反射来放大物体图像。当光线通过显微镜的物镜时，会发生折射和聚焦，然后通过目镜再次折射，最终形成放大的图像。这种显微镜的放大倍数取决于物镜和目镜的焦距和放大倍数。荧光显微镜的原理则不同，它利用特定波长的紫外线或蓝紫光激发荧光物质，使其发出可见的荧光。荧光显微镜通常包括激发光源、滤光片、聚光镜、标本架和显微镜主体等部分。在观察时，标本中的荧光物质被激发光源照射后发出荧光，再通过显微镜的透镜系统放大并显示出来。荧光显微镜的优点是可以观察到一些难以在普通光学显微镜下观察到的物质，如染色体、DNA等。普通光学显微镜和荧光显微镜的异同点主要体现在以下几个方面：光源和激发方式：普通光学显微镜通常使用可见光作为光源，而荧光显微镜则使用特定波长的紫外线或蓝紫光作为激发光源，以激发荧光物质。放大倍数：普通光学显微镜的放大倍数通常在几百倍到一千倍左右，而荧光显微镜的放大倍数可以达到一千倍以上，甚至达到数千倍。观察效果：普通光学显微镜主要用于观察物体表面的形态和结构，而荧光显微镜则可以观察到一些难以在普通光学显微镜下观察到的物质，如染色体、DNA等。应用范围：普通光学显微镜在生物学、医学、工业制造等领域有广泛应用，而荧光显微镜则更多应用于生物学、医学、化学等领域中的荧光标记和荧光蛋白观察等。总之，普通光学显微镜和荧光显微镜虽然都是用来观察微小物体的工具，但它们的原理、应用范围和效果都有所不同。在实际应用中，可以根据需要选择合适的显微镜来观察微小物体。

荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别

一个高档一个低档而已，看个人需要
传统荧光显微镜使用荧光物质标志细胞中的特定结构，不仅图像与背景的对比度增强，而且由于许多荧光显微镜的光源使用短波长的紫外光当所观察的荧光标本稍厚时，传统荧光显微镜一个难以克服的缺点就显现出来：焦平面以外的荧光结构模糊、发虚。原因是大多数生物学标本是层次区别的重叠结构(如耳蜗基底膜。其实是外毛细胞 、多种支持细胞 、神经纤维等组成的空间结构),，在普通光学显微镜下聚焦平面的变化， 会表现出不同的形态。假若荧光标记的结构在不同层次上都有分布，且重叠在一起，反射荧光显微镜(epifluorescent microscope)不仅从焦平面上收集光量，而且来自焦平面上方或下方的散射荧光也被物镜所接收，荧光显微镜的光学分辨率就要大大降低 。
激光扫描共聚焦显微镜用激光作为光源，采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对所观察的对象进行数字图像处理观察、分析和输出。 其特点是可以对样品进行断层扫描和成像，进行无损伤观察和分析细胞的三维空间结构[3]。 同时，利用免疫荧光标记和离子荧光标记探针，该技术不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可以对活细胞的结构、分子、离子及生命活动进行实时动态观察和检测，在亚细胞水平上观察诸如 Ca2+，pH 值，膜电位等生理信号及细胞形态的变化，成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的研究工具[3] ，极大地丰富了人们对细胞生命现象的认识。
荧光显微镜和激光共聚焦显微镜的区别
激光共聚焦显微镜是采用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。主要系统包括激光光源、自动显微镜、扫描模块（包括共聚焦光路通道和针孔、扫描镜、检测器）、数字信号处理器、计算机以及图象输出设备（显示器、彩色打印机）等。通过激光扫描共聚焦显微镜，可以对观察样品进行断层扫描和成像。因此，可以无损伤的观察和分析细胞的三维空间结构。
同时，通过激光扫描共聚焦显微镜也是活细胞的动态观察、多重免疫荧光标记和离子荧光标记观察的有力工具.精确地对光谱的本质进行分析，区分发射光谱高度重叠的不同标记的信号。
最重要的是，对于多色的荧光染色，它能彻底消除了荧光串色的影响，同时最大限度的减少了样品荧光信号的损失。这些都是一般光镜所不能达到的。
激光共聚焦显微镜是在在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针。主要应用在生物领域及医学研究中，能得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在亚细胞水平上观察诸如Ca2+ 、PH值，膜电位等生理信号及细胞形态的变化，是形态学，分子生物学，神经科学，药理学，遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。
还有一种区别于生物学领域的激光共聚焦显微镜。它是以共聚焦技术为原理，是用于对各种精密器件及材料表面进行微纳米级测量的检测仪器。
基于转盘共聚焦光学系统，在材料生产检测领域中能对各种产品、部件和材料表面的面形轮廓、表面缺陷、磨损情况、腐蚀情况、平面度、粗糙度、波纹度、孔隙间隙、台阶高度、弯曲变形情况、加工情况等表面形貌特征进行测量和分析。
激光共聚焦显微镜是在在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针。主要应用在生物领域及医学研究中，能得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在亚细胞水平上观察诸如Ca2+ 、PH值，膜电位等生理信号及细胞形态的变化，是形态学，分子生物学，神经科学，药理学，遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。
还有一种区别于生物学领域的激光共聚焦显微镜。它是以共聚焦技术为原理，是用于对各种精密器件及材料表面进行微纳米级测量的检测仪器。
基于转盘共聚焦光学系统，在材料生产检测领域中能对各种产品、部件和材料表面的面形轮廓、表面缺陷、磨损情况、腐蚀情况、平面度、粗糙度、波纹度、孔隙间隙、台阶高度、弯曲变形情况、加工情况等表面形貌特征进行测量和分析。
一、原理不同
1、荧光显微镜：是以紫外线为光源， 用以照射被检物体， 使之发出荧光， 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。
2、激光共聚焦显微镜：在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针。
二、特点不同
1、荧光显微镜：用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光。
2、激光共聚焦显微镜：利用计算机进行图象处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象，以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化。
三、用处不同
1、荧光显微镜：荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。
2、激光共聚焦显微镜：激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究，并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研究手段，结合其他相关生物技术，在形态学、生理学、免疫学、遗传学等分子细胞生物学领域 得到广泛应用。
参考资料来源：百度百科-激光扫描共聚焦显微镜
参考资料来源：百度百科-荧光显微镜

什么是荧光显微镜？


荧光显微镜是以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光是生物和分析显微镜中最常用的物理现象之一，主要是因为它具有灵敏度高、特异性强的特点。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。荧光显微镜甚至允许用户决定单个分子种类的分布、数量及其在细胞内的位置。可以实现共区域化和相互作用的研究，离子浓度以及观察细胞内间的胞吞和胞吐过程。借助超分辨率荧光显微镜，甚至可以成像亚分辨率结构。徕卡荧光显微镜DMi8具有很多荧光创新特性，对于高速成像，可使用外部荧光转换功能或专利型自动荧光照明强度管理系统（FIM），实现快速、准确地荧光成像。对于标准应用，可通过RFID自动识别轻松安装荧光滤块。

荧光显微镜为什么看不到细胞轮廓

荧光显微镜看不到细胞轮廓的原因：1、荧光显微镜使用的是荧光染料、荧光蛋白等标记物来标记细胞器或分子，无法准确显示出细胞的形态。2、与常规显微镜不同，荧光显微镜着眼于特定的细胞组分，而不是“全貌”。

荧光显微镜怎么看蓝色荧光

使用滤光片等。要观察蓝色荧光，应选用合适的激发光源和滤光片，蓝色荧光对蓝色光敏感，可以使用波长为480纳米左右的激发光源，在荧光显微镜中，往往会配备一组可更换的滤光片，包括激发滤光片和发射滤光片。荧光显微镜是一种使用荧光染料或标记物探测样品的显微镜。

常见荧光显微镜的参数

常见荧光显微镜的技术参数如下：
1、光源输出：LED光源，无衰减输出＞3万小时，使用寿命内光强稳定、无衰减。
2、激发光波长范围：460~490nm，适用于临床免疫荧光检测需要。
3、响应时间：光源启动后响应时间为即开即用型（达到100%预设强度）。
4、安全性：冷光源，安全环保，不含汞等有毒物质，不含有害紫外线。
5、电源：有UPS电源供应，适用突然停电或移动操作环境。
6、配套荧光成像与图文报告系统软件系统：镜下荧光图像实时显示；荧光核型软件判读系统；能与LIS相连，生成图文报告；图像可实现多人同时观察，满足教学与科研应用。
7、证书：具有CFDA注册证。
8、售后服务：每年至少提供一次专业的光强校验服务和校准服务，以及保修期间的免费维修服务。
荧光显微镜的原理和基本构造简述：
荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源，经过滤色系统发出一定波长的光（如紫外光3650入或紫蓝光4200入）作为激发光、激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后，再通过物镜和目镜的放大进行观察。这样在强烈的对衬背景下，即使荧光很微弱也易辨认，敏感性高，主要用于细胞结构和功能以及化学成分等的研究。
荧光显微镜的基本构造是由普通光学显微镜加上一些附件（如荧光光源、激发滤片、双色束分离器和阻断滤片等）的基础上组成的。荧光光源—般采用超高压汞灯（50~200W），它可发出各种波长的光，但每种荧光物质都有一个产生最强荧光的激发光波长，所以需加用激发滤片（一般有紫外、紫色、蓝色和绿色激发滤片）。

普通光学显微镜和荧光显微镜的原理有何异同点

相同点：1）均为光学显微镜；2）均可对生物样品进行定性和定量分析。
不同点：1）二者所用光源不同：普通光学显微镜用的是自然光，而荧光显微镜则多为紫外光；2）荧光显微镜含有一套特殊的滤镜系统；3）荧光显微镜还具有灵敏度高、特异性强等特点；4）荧光显微镜只能使用无荧光载玻片和无荧光油等。
相同点：1.均为光学显微镜；2.均可对生物样品进行定性和定量分析。不同点：1.二者所用光源不同：普通光学显微镜用的是自然光，而荧光显微镜则多为紫外光；2.荧光显微镜含有一套特殊的滤镜系统；3.荧光显微镜还具有灵敏度高、特异性强等特点；4.荧光显微镜只能使用无荧光载玻片和无荧光油等。【点击了解产品详情】有问题的话可以关注下蔡司显微镜。蔡司显微镜从属的北京普瑞赛司仪器有限公司拥有一支充满活力的高素质团队，同时具有一个以中科院、大学、大型企业为主的应用专家系统，能根据客户的需求，提供创新的解决方案，并有专业知识强硬、经验丰富的工程师为客户提供安装、维修、技术指导等售后服务。经过多年的发展，公司已经确立了符合行业特点，有利于公司发展和用户利益的部门和组织结构。

荧光显微镜采用的光源是

【答案】：B
激光扫描共聚焦显微镜的工作原理是利用激光扫描束照射经照明针孔形成的点光源，对标本内焦面的每一点进行扫描，标本上的被照射点在探测针孔处成像。多数荧光素均需短波长激发，需采用紫外光作为激发光源。普通光学显微镜采用可见光作为光源。